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    艾吉泰康助力无创检测HBV整合事件：肝癌预警与乙肝治愈的新路径

    2025-12-04 14:42:50

    阅读(38)

      研究速览： 重庆医科大学研究团队在 Virologica Sinica 期刊上发表题为Detection of HBV DNA integration in plasma cell-free DNA of different HBV diseases utilizing DNA capture strategy 的研究成果。


      该研究首次系统性地证明，通过特异性乙型肝炎病毒（HBV）探针捕获测序策略，可以高精度、无创地在慢性乙肝（CHB）、肝硬化（LC）乃至肝癌（HCC）患者的血浆游离DNA（cfDNA）中检测到HBV病毒与宿主基因组的整合断点。


      艾吉泰康有幸为该研究设计并合成覆盖HBV多个基因型（A–H）的特异性捕获探针。

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      ▍ 研究背景：难以逾越的“整合”鸿沟  

      HBV整合入肝细胞基因组是导致慢性乙肝（CHB）进展为肝硬化（LC）和肝细胞癌（HCC）的主要驱动因素之一 。同时，整合后的病毒片段能持续转录表达表面抗原（HBsAg），是抗病毒治疗后难以实现“功能性治愈”（HBsAg持续丢失）的关键障碍。


      然而，传统上对HBV整合的检测主要依赖创伤性的肝组织活检，这极大地限制了其在大规模筛查和长期动态监测中的应用 。因此，开发一种高灵敏度的无创检测方法，以评估病毒整合状态，成为乙肝管理和肝癌早筛领域的迫切需求。


      ▍ 方法学创新：血液中精准“捕获”病毒踪迹  

      本研究的核心突破在于构建了一套优化的DNA探针捕获联合高通量测序（Capture-NGS）工作流程 ，显著提高了在血浆cfDNA这一低浓度样本中检测病毒整合的准确性和灵敏度。


       严格噪声过滤

      沿用并改进了High-throughput Viral Integration Detection（HIVID）策略，通过优化的生物信息学分析，特别是引入严格的过滤标准（如标准化独特序列支持数（the normalized number of support unique sequences，nnsus，代表整合负荷）≥0.7和独特序列支持数（the number of support unique sequences，nsus）≥3），有效排除了背景噪声，确保了检测的特异性。


      性能验证

      相比传统HIVID方法，优化的策略在人工嵌合DNA样本中展示出更高的准确率（96.8% vs 70.0%）和阳性预测值（PPV 93.3% vs 73.7%）。


      早期整合事件检测能力

      该方法在体外细胞模型（HBV感染的HepG2-NTCP细胞）中，可在感染后第1天即检测到整合事件，显示其适用于检测病毒感染的早期整合过程。


       ▍主要研究发现：整合负荷与肝癌进展相关

      研究团队对25名HBsAg阳性、HBeAg阴性的患者（CHB, LC, HCC）的血浆cfDNA进行了系统分析。


      1、临床适用性与高阳性率


      广泛检出： 成功在25例患者中的22例（88%）血浆cfDNA样本中检测到HBV整合断点。共检测到333个整合断点，证实该方法在临床样本中具有高度可行性。


      2、整合负荷与疾病进展的关联


      HCC负荷显著升高： 肝细胞癌（HCC）患者的nnsus显著高于慢性乙肝（CHB）和肝硬化（LC）患者（P < 0.05）。这提示整合负荷可能是一个有力的生物标志物，反映疾病进展的严重程度。


      3、整合特征与致癌机制


      病毒整合位点： HBV整合断点显著富集于病毒基因组的nt1800附近，支持“双链线性DNA（dslDNA）”是体内整合主要底物的理论。整合断点在人体染色体上呈随机分布，但令人关注的是，超过六成（61.86%）的断点位于基因编码区，提示HBV整合可能通过插入突变影响宿主基因功能。 例如，研究发现了HBV DNA序列插入到肝癌相关基因 KMT2B编码区的案例，可能导致异常表达，驱动肿瘤发生。


      整合机制： 整合发生涉及“非同源末端连接（NHEJ）”和“微同源介导末端连接（MMEJ）”两种主要的DNA修复机制。



      ▍ 临床启示与未来展望  


      这项研究为 HBV 感染管理和肝癌防治开辟了一条全新的"液体活检"之路。


      1、无创肝癌风险评估


      cfDNA 中 HBV 整合负荷有望成为预测慢性乙肝患者进展为 HCC 的无创预警指标。未来大规模前瞻性研究一旦证实其预后价值，将极大地改变目前的肝癌早筛和监测策略。


      2、抗病毒疗效的监测工具

      由于整合 HBV 是 HBsAg 持续存在的主要原因之一，该方法可作为一种有前景的无创工具，用于动态评估新型抗病毒疗法（如靶向整合 DNA 或 cccDNA 的药物）的实际疗效。


      3、方法学推广价值


      Capture-NGS + 严格生物信息学过滤的策略，为其他病毒（如 HPV、HIV）或病原体与宿主基因组的无创整合研究，提供了可借鉴和推广的技术范式。



      这项研究首次系统地描绘了不同肝病阶段患者血浆 cfDNA 中的 HBV 整合图谱，为实现 HBV 感染的精准、无创监测和肝癌早期干预，迈出了关键而坚实的一步。

      原文链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1995820X24000828?via%3Dihub


       产品信息  

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      艾吉泰康始终致力于提供全方位、多层次、多场景的 HBV 检测解决方案，以技术创新赋能病原精准捕获。


      如果有相关需求或希望了解更多产品信息，欢迎联系我们！


      电话：010-89146623/ 18701592757

      官网：https://www.igenetech.cn

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    来源：艾吉泰康iGeneTech（艾小薇 原创）

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